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[자연과학] 생물실험 - 광합성 색소의 분리

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작성일17-11-29 19:48

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6) 여과지에 전개된 엽록소 밴드를 관찰하고 그린다.

5. Principle : 종이크로마토그래피의 特性(특성)과 실험하는 방법을 이용하여 식물의 광합성
색소를 분리하는 Rf(전개율)을 구하여보자.

6. Material & Reagent
1) Material
달개비 잎, 여과지, 가위, 스포이트, 시험관, 자, 연필, 시험관꽂이
2) Reagent
전개용액(페트롤리움에테르 : 아세톤 〓 9 : 1),

7. Method
※ 달개비를 아세톤에 놓고 막자사발에 갈아서 원심분리기를 이용 상등액을 취하는 것까지는 조교언니께서 하셨다.

`종이 크로마토그래피의 원리`

종이 크로마토그래피는 원리상으로 분배 크로마토그래피의 일종이다.
5) 전개액이 여과지 위에 50mm 정도까지 전개 되었을 때 여과지를 꺼내어 전개액이 전개된 부분을 연필로 표시한 후 여과지를 완전히 말린다. 일반적으로 거름종이는 약 20%의 흡착수가 포함되어 있으므로 거름종이에 시료를 녹이는 것에 해당되며, 거름종이는 정지상을 지지해 주는 지지체(supporting medium) 역할을 한다.
종이 크로마토그래피에 있어서 거름종이에 흡착된 용매(물)는 정지상의 구실을 하고, 물과 섞이지 않는 유기 용매는 이동상의 구실을 한다.
이때, 점적은 색소를 떨어뜨리고 말리고 하는 방법을 반복하여 4~5번정도 한다. 각각의 밴드의 Rf값을 구한다. (여과지에 손이 닿지 않도록 주의)
3) 스포이트을 이용하여 준비된 엽록소 추출액을 연필로 그은 선 중앙에 점적한다.
이때, 여과지가 시험관 벽면에 닿지 않도록 주의하고 전개용매에 끝이 0.5cm만 잠기도록 한다.
시료 용액을 거름종이에 소량 찍어 점적하고 말린 다음, 밀폐된 용기 속의 물로 포화된 유기 용매에 그 한쪽 끝을 담가 두면, 용매는 모세관 현상에 의하여 종이의 위쪽으로 스
실험결과/생물의학

다.

Rf 〓 (특정 색소가 이동한 거리/ 전개액이 이동한 거리)

8. Result
엽록소 b 점적한 부분에서 가장 가까운 곳의 노란색을 띤 녹색 밴드 엽록소 a 그 위에 푸른색을 띤 녹색 밴드 크산토필 그 위쪽에 몇…(투비컨티뉴드 ) 개의 밴드 카로틴 전개된 가장 위쪽의 노란 밴드

결과에서의 색깔 이동한 거리 Rf(전개율) 추정되는 색소 ① 진한풀색부분 7mm 7/48〓0.146 엽록소 b ② 연두색 22mm 22/48〓0.458 엽록소 a ③ 녹색 38mm 38/48〓0.792 크산토필 ④ 노란색 46.5mm 46.5/48〓0.969 카로틴
이번 실험은 녹색식물을 이용하여 한 용매(주로 물)는 정지상의 구실을 하고 다른 용매는 이동상의 구실을 하여 물질을 분리하는 실험으로 종이 크로마토그래피이다.
4) 여과지를 시험관 마개에 대고 전개 용액이 들어있는 시험관에 넣는다.
이 때, 한 용매(주로 물)는 정지상의 구실을 하고 다른 용매는 이동상의 구실을 하여 물질을 분리하는데, 이 때 정지상의 지지체(supportin medium)에 따라 종이 크로마토그래피, 얇은 막(thin layer) 크로마토그래피, 분배 대롱 크로마토그래피 등으로 분류하며, 용도에 따라 여러 종류의 물질 분리에 이용된다된다.
1) 여과지를 15×2cm 되도록 자른다.
이러한 현상은 물과 유기 용매에 대한 용해도의 차이 때문에 이동 속도가 각각 다르게 되어 나타나는 현상인 것이다.
분배 크로마토그래피에 의한 분리는 두 가지 종류의 서로 혼합되지 않는 용매 사이에서 혼합물들이 두 용매에 대한 분배 계수가 다른 원리를 사용한다.[자연과학] 생물실험 - 광합성 색소의 분리





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순서


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1. Title : 광합성 색소의 분리

2. Date : 0000년 0월 00일 0요일

3. Name :

4. Purpose : 종이 크로마토그래피를 이용하여 시금치(우리실험에서는 달개비)잎에서
광합성 색소를 분리한다.
결과에서는 진한풀색, 연두색, 녹색, 노란색 순으로 전개용액을 따라 올라갔다.
2) 한쪽 끝에서 1cm 되는 곳을 잘라서 삼각형을 만든 다음 이곳으로부터 2cm 되는 곳에 연필로 선을 긋는다.

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